低氧诱导因子-1αsiRNA对HaCaT细胞诱导型一氧化氮合酶表达的影响
Effects of hypoxia inducible factor-1 α siRNA on inducible nitric oxide synthase expression in HaCaT cells
摘要目的:观察低氧诱导因子-1α( hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)RNA干扰对低氧条件下永生化角质形成细胞株HaCaT细胞HIF-1α和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响.方法:将HaCaT细胞分为4组:常氧对照组(无干预因素)、低氧组(低氧培养24h)、脂质体对照组(转染空载脂质体后低氧培养24h)、RNA干扰组(转染脂质体介导的RNA干扰序列后低氧培养24h).荧光实时定量PCR法检测各组HaCaT细胞的HIF-1α和iNOS mRNA表达水平,Western印迹检测各组HaCaT细胞HIF-1α和iNOS蛋白表达水平.结果:低氧组和常氧对照组HIF-1α mRNA的表达无明显差异(P>0.05),而低氧组iNOS mRNA和蛋白及HIF-1α蛋白的表达均较常氧对照组明显增高(P<0.05);RNA干扰组HIF-1α和iNOS mRNA及蛋白的表达均较脂质体对照组显著降低(P<0.05).结论:低氧条件下可以使HaCaT细胞HIF-1α和iNOS的表达增加,而抑制HIF-1α的表达可以使低氧条件下HaCaT细胞iNOS的表达减少.
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