Galectin-1在高糖腹透液诱导人腹膜间皮细胞转分化中的作用
Role of galectin-1 on epithelial-to-mesenchymal transition induced by high glucose peritoneal dialysate in human peritoneal mesothelial cells
摘要目的:研究人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)中galeetin-1的表达和在高糖腹透液(peritoneal dialysate solution,PDS)刺激下galectin-1表达的变化及其与上皮细胞-间充质细胞转分化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)的关系.方法:以HPMCs为研究对象,实验分为:正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),含1.5%葡萄糖的PDS(1.5% PDS)组,2.5%PDS组及4.25% PDS组.培养48 h后,采用实时定量PCR和Western印迹检测galectin-1,vimentin和zo-1 mRNA和蛋白的表达水平,分析galectin-1与vimentin和zo-1表达的相关性.使用阳离子脂质体转染galectin-1 siRNA至HPMCs内,实验分为:正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖),高糖组(4.25% PDS)和转染组(galectin-1 siRNA +4.25% PDS).观察galectin siRNA干预后vimentin和zo-1 mRNA和蛋白的表达水平.结果:不同浓度PDS刺激HPMCs 48 h后,与对照组比,galectin-1mRNA表达上调,尤以4.25%PDS组明显(P<0.05),其蛋白水平的表达均明显上调(P<0.05),且具有浓度依赖性;同时vimentin mRNA表达上调,以2.5%PDS组和4.25%PDS组更明显(P<0.05),其蛋白水平的表达均明显上调(P<0.05);而zo-1mRNA和蛋白水平的表达均明显下调(P<0.05).不同浓度高糖PDS刺激下galectin-1 mRNA和蛋白表达水平与vimentin mRNA和蛋白表达水平呈正相关(P<0.05);与zo-1 mRNA和蛋白表达水平呈负相关(P<0.05).Galectin-1 siRNA干预后vimentin mRNA和蛋白水平的表达较高糖组明显下调(P<0.05),而zo-1 mRNA和蛋白水平的表达较高糖组明显上调(P<0.05).结论:Galectin-1与高糖PDS诱导的HPMCsEMT相关,galectin-1 siRNA能够抑制高糖PDS诱导的HPMCs转分化.Galectin-1可能参与腹膜纤维化的发生环节,成为防治腹膜纤维化的新靶点.
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