摘要目的:本课题组前期研究证实组蛋白甲基转移酶2(SET and MYND domain-containing protein 2,SMYD2)高水平表达在肝癌细胞进展过程中发挥重要作用.MiR-200b作为肿瘤抑制基因参与多种肿瘤的发生和发展.本研究旨在探究miR-200b与SMYD2在肝癌中的作用机制.方法:采用实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及蛋白质印迹法分别检测癌组织及癌旁组织中SMYD2和miR-200b的表达水平.通过双荧光素酶报告验证SMYD2与miR-200b的靶向关系.通过沉默及过表达miR-200b研究其对SMYD2及下游p53/CyclinE1通路的影响,并通过沉默SMYD2研究其对肝癌细胞株的增殖及细胞周期蛋白(Cyclin)E1的影响,进一步证实SMYD2与p53/CyclinE1的关系.结果:与癌旁组织相比,肝癌组织中miR-200b表达显著减少,而SMYD2表达显著增加(均P<0.05),SMYD2与miR-200b呈负相关(P<0.01).双荧光素酶报告结果显示:在工具细胞HEK 293T细胞中,miR-200b直接靶向结合SMYD2并抑制其表达.在肝癌细胞株MHCC-97L中下调miR-200b可增加SMYD2的表达(P<0.01)并促进肝癌细胞的增殖(P<0.05),上调miR-200b则得出相反的结果.在MHCC-97L细胞株中沉默SMYD2可抑制细胞的增殖(P<0.01),并导致p53水平的升高和CyclinE1表达的下降(均P<0.05).结论:MiR-200b通过靶向结合SMYD2及调控p53/CyclinE1通路参与肝癌的进展,有望成为治疗肝癌细胞的新靶点.