换一批miR-145-3p对大鼠肠神经干细胞增殖与分化的影响
Effects of MiR-145-3p on Proliferation and Differentiation of Enteric Neural Stem Cells
摘要[目的]探讨微小核糖核酸145-3p(miR-145-3p)对SD大鼠肠神经干细胞(ENSCs)增殖及分化的影响.[方法]原代培养法提取孕18 d的SD大鼠肠神经干细胞(ENSCs),观察其细胞学特性,采用巢蛋白(Nestin)及神经胶质纤维蛋白(GFAP)免疫荧光进行鉴定.分别采用脂质体及慢病毒载体过表达ENSCs的miR-145-3p进行转染,采用荧光显微镜及实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测转染效果.Edu细胞增殖实验及诱导分化实验明确miR-145-3p对ENSCs增殖及分化的影响.[结果]原代培养ENSCs可见大量神经球样结构形成,免疫荧光证实细胞Nestin和GFAP均阳性,具有干细胞特性;在慢病毒转染组内,miR-145-3p过表达组的miR-145-3p相对表达量为3.52±0.24,显著高于阴性对照组的0.01±0.01,其差异具有统计学意义(P＜0.05);miR-145-3p过表达组的Edu阳性率为(15.23±1.17)％,显著低于阴性对照组的(22.38±1.52)％;采用分化培养基处理后,miR-145-3p慢病毒载体转染组的GFAP阳性细胞比例为(21.47±1.98)％,显著低于阴性对照组的(33.86±2.52)％.[结论]对于ENSCs而言,慢病毒载体转染效率较高,miR-145-3p可抑制ENSCs的增殖与分化,其可能在肠神经系统发育过程中发挥重要作用.
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