microRNA let-7a-3调节结直肠癌中RAB11FIP2的表达
MicroRNA let-7a-3 Regulates RAB11FIP2 Expression in Colorectal Cancer
摘要目的 探索microRNA let-7a-3在结直肠癌(CRC)中的表达状态、生物学功能及可能的机制.方法 使用联合亚硫酸氢钠限制性内切酶分析法(COBRA)或亚硫酸氢盐测序法(BSP)分析let-7a-3启动子内的DNA甲基化状态.使用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测CRC细胞系中let-7a-3和RAB11FIP2的表达.使用流式细胞仪和锚定-非依赖性生长试验检测let-7a-3表达上调时CRC细胞凋亡水平及集落形成能力.结果 let-7a-3基因甲基化在CRC组织中很常见,let-7a-3的甲基化状态与组织来源有关(P<0.001).去甲基化剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-dC)可以诱导let-7a-3的表达.let-7a-3表达上调时促进细胞凋亡并抑制细胞集落形成能力(P<0.001).let-7a-3通过靶向RAB11FIP2基因3'-UTR区域中的同源DNA区域抑制RAB11FIP2的表达.结论 CRC中let-7a-3甲基化是一种常见现象,let-7a-3过表达可诱导细胞凋亡,抑制锚定非依赖性生长,提示let-7 a-3可能是结直肠癌治疗的潜在生物标志物.
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