针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马区环状RNA_009775表达的研究
Acupuncture regulating the expression of circRNA_009775 in hippocampus of rats with cerebral ischemia-reperfusion injury
摘要目的 研究针刺对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠海马区环状RNA_009775 表达的影响,探索针刺对CIRI可能的作用机制.方法 将 39只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组,每组 13只.除假手术组外,其余两组均采用线栓法制备CIRI模型.造模后,针刺组大鼠捆绑固定行针刺干预,间隔 12h进行 1次,共 7次;假手术组与模型组大鼠仅捆绑不针刺.Garcia评分法、TTC染色法评估针刺疗效;基因芯片技术筛选针刺组/模型组、模型组/假手术组核心共同差异表达circRNA;qRT-PCR法对芯片筛选结果进行验证;TargetScan软件预测核心circRNA的下游miRNA及mRNA,构建核心circRNA的调控网络,并对mRNA进行基因本体功能富集分析;Western blot法验证神经元核抗原抗体(neuron specific nuclear protein,NEUN)表达量.结果 干预后,与假手术组相比,模型组大鼠Garcia评分、NEUN和circRNA_009775 表达量显著降低(P<0.01),脑梗死面积比显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组脑梗死面积比显著降低(P<0.01),Garcia评分、NEUN和circRNA_009775 表达量显著升高(P<0.05 或P<0.01).芯片筛选核心共同差异表达circRNA,经qRT-PCR验证circRNA_009775 表达趋势与芯片结果一致,结合靶关系预测,构建了含有 1个circRNA、12个miRNA、31个mRNA的调控网络.基因本体功能富集分析显示mRNA主要涉及神经系统发育、神经元生成等生物过程.结论 针刺具有改善CIRI大鼠神经功能缺损、降低脑梗死面积、部分减轻海马区神经元损伤的作用,其机制可能与调控circRNA_009775 介导的潜在调控网络、促进神经系统发育、神经元生成等生物过程有关.
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