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基于Bax/Bcl-2信号通路探究钩藤提取物对实验兔复发性单纯疱疹病毒性角膜炎的作用

Effects of Uncaria rhynchophylla extracts on recurrent herpes simplex keratitis in experimental rabbits via the Bax/Bcl-2 signaling pathway

摘要目的 基于Bcl-2相关X蛋白(Bax)/B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)信号通路探究钩藤提取物对实验兔复发性单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)的作用.方法 选用普通级大耳白兔40只,随机分为正常对照组、模型对照组、阿昔洛韦组、钩藤水提取物组、钩藤醇提取物组,每组8只.除正常对照组外,其余各组均采用Ⅰ型单纯疱疹病毒感染眼部,并于感染后21 d(眼部感染症状恢复后),采用紫外线诱导复发性感染,以制备复发性HSK模型.模型对照组经眼滴入等量生理盐水,阿昔洛韦组每天灌胃阿昔洛韦,钩藤水提取物组和钩藤醇提取物组每天经眼滴入相应的钩藤提取物,连续干预14 d.分别于诱导复发后次日(给药前)、给药7 d、给药14 d进行角膜荧光染色评分;于给药前、给药14 d进行泪液病毒滴度检测;于给药14 d后进行角膜组织病理学检查,并采用Western blot检测角膜组织中Bax、Bcl-2、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达水平.结果 与正常对照组比较,模型对照组角膜荧光染色评分、泪液病毒滴度和角膜组织病理评分显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,给药14 d,钩藤水提取物组、钩藤醇提取物组和阿昔洛韦组角膜荧光染色评分和泪液病毒滴度均降低(P<0.05,P<0.01),阿昔洛韦组、钩藤醇提取物组的角膜组织病理评分显著降低(P<0.01).与正常对照组比较,模型对照组角膜的Bax和Caspase-3蛋白表达均显著增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著减少(P<0.01);与模型对照组比较,钩藤水提取物组、钩藤醇提取物组Caspase-3、Bax蛋白表达减少(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05).与钩藤水提取物组比较,钩藤醇提取物组给药7 d和14 d的角膜荧光染色评分显著减小(P<0.01),泪液病毒滴度和角膜组织病理评分均显著降低(P<0.01).结论 钩藤不同工艺提取物对复发性HSK具有显著治疗作用,其药理作用机制可能与其调节Bax/Bcl-2/Caspase-3凋亡信号通路,抑制病毒感染引起的角膜细胞凋亡有关,且钩藤醇提取物的药效作用更强.

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