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基于Akt/mTOR信号通路探究芍药甘草汤和生麦芽对高泌乳素血症的作用机制

To Explore the Mechanism of Shaoyao Gancao Decoction(芍药甘草汤)and Raw Maiya(Hordei Fructus Germinatus)on Hyperprolactinemia Based on Akt/mTOR Signaling Pathway

摘要目的:分别考察生麦芽、芍药甘草汤对高泌乳素血症(HPRL)大鼠血清泌乳素相关激素水平及乳腺组织病理形态的影响,以及对乳腺组织p-Akt、p-mTOR、LC3等蛋白表达水平的影响.方法:随机取8只大鼠作为正常组,32只大鼠皮下注射甲氧氯普胺制备高泌乳素血症模型.造模成功的32只大鼠随机分为模型组、芍药甘草汤组、生麦芽组和溴隐亭组,每组8只.各药物组大鼠灌胃给予相应药物,正常组和模型组大鼠给予等体积蒸馏水,连续给药30 d.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清中泌乳素(PRL)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(Pg)、促卵泡素(FSH)含量;采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠乳腺组织病理形态变化;蛋白免疫印迹法(Western blotting)及免疫组化(IHC)检测大鼠乳腺组织p-Akt、p-mTOR、LC3等蛋白表达水平.结果:模型组大鼠血清PRL水平明显高于正常组(P<0.01),血清LH、FSH、Pg和E2水平明显低于正常组(P<0.01);芍药甘草汤组、生麦芽组、溴隐亭组大鼠血清PRL水平明显低于模型组(P<0.01);芍药甘草汤组大鼠血清FSH、Pg水平明显高于模型组(P<0.05或P<0.01);生麦芽组大鼠血清FSH、Pg和E2水平明显高于模型组(P<0.05或P<0.01);溴隐亭组大鼠血清LH、FSH、Pg和E2水平明显高于模型组(P<0.05或P<0.01).HE染色结果显示模型组大鼠乳腺增生,小叶数量、腺泡数量明显多于正常组,小叶体积大于正常组,并出现腺泡和导管扩张;芍药甘草汤组、生麦芽组和溴隐亭组大鼠乳腺增生情况均得到改善,乳腺小叶数量、腺泡和导管增生明显少于模型组.Western blotting检测结果显示,模型组大鼠乳腺组织中p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/Ⅰ高于正常组(P<0.01);芍药甘草汤组、生麦芽组和溴隐亭组大鼠乳腺组织中p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/Ⅰ均低于模型组(P<0.01).IHC检测结果显示,模型组大鼠乳腺组织中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、LC3蛋白表达水平明显高于正常组(P<0.05或P<0.01);芍药甘草汤组、生麦芽组、溴隐亭组大鼠乳腺组织中p-Akt、p-mTOR、LC3蛋白表达水平明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);芍药甘草汤组、溴隐亭组大鼠乳腺组织中mTOR蛋白表达水平明显低于模型组(P<0.05).结论:芍药甘草汤、生麦芽能够有效降低高泌乳素血症大鼠血清泌乳素水平,抑制乳腺组织增生,其机制可能与减轻大鼠乳腺组织中自噬作用有关.

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