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显齿蛇葡萄醇提物含药血清对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症模型的抗炎作用

Study on Anti-Inflammatory Effects of Serum Containing Ampelopsis Grossedentata Alcohol Extract on LPS Induced RAW264.7 Inflammation Model

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摘要目的:采用血清药物化学的研究方法,分析显齿蛇葡萄醇提物(AGEE)大鼠口服后的入血成分,基于入血成分研究AGEE含药血清对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症的抗炎作用.方法:12只SD大鼠随机分为AGEE组和空白组,分别给予AGEE(5.4g/kg)和纯净水灌胃,以制备含药血清和空白血清,采用HPLC-DAD分析其含药血清色谱图,通过与空白血清色谱图对比分析,探讨AGEE的体内移行成分.以RAW264.7细胞为研究对象,将细胞分为5％或15％空白血清组,5％或15％空白血清+LPS组,以及5％或15％含药血清+LPS组,按相应条件培养24h后,采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测每组细胞存活率;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞中TNF-α、IL-6、IL-10水平.结果:AGEE含药血清与空白血清比较,发现16个色谱峰,其中9种为原型成分入血,7种可能是AGEE在大鼠体内产生的代谢物.CCK-8检测结果表明,各组细胞按上述条件培养24 h后均未发现毒性.5％或15％空白血清+LPS组细胞中TNF-α、IL-6、IL-10水平高于5％或15％空白血清组(P＜0.01或P＜0.05).15％含药血清+LPS组细胞中TNF-α水平低于5％空白血清+LPS组(P＜0.05);5％或15％含药血清+LPS组细胞IL-6水平低于5％或15％空白血清+LPS组(P＜0.01);5％或15％含药血清+LPS组细胞IL-10水平高于5％或15％空白血清+LPS组(P＜0.01或P＜0.05).结论:建立了 AGEE含药血清HPLC-DAD分析方法,明确了其活性物质基础.AGEE含药血清可降低LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应.