摘要目的:研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对高糖诱导的内皮祖细胞(EPCs)氧化应激损伤的保护机制,为AS-Ⅳ的临床开发应用奠定基础.方法:取足月新生儿脐带血,采用密度梯度离心法分离出单个核细胞,采用Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1双荧光染色法鉴定出EPCs,将鉴定成功的人EPCs分别用30 mmol/L的葡萄糖干预120 h,制成高糖诱导氧化应激损伤细胞模型,实验分为黄芪甲苷+高糖受损EPCs组、黄芪甲苷+高糖受损EPCs+ML385(Nrf2抑制剂)组、高糖受损EPCs组和正常EPCs组(5 mmol/L的葡萄糖干预120 h),用流式细胞术检测活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测氧化应激相关蛋白的表达和Nrf2、Keap 1及NFE2L2/ARE依赖性信号通路蛋白的表达.结果:与正常EPCs组比较,高糖受损EPCs组细胞内ROS水平显著升高,GSH-Px、CAT、SOD活力均明显降低,LDH活力明显升高,Nox2、Keap 1表达显著升高,Nrf2、HMOX1、xCT、GPX4表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与高糖受损EPCS组比较,黄芪甲苷+高糖受损EPCs组细胞内ROS水平降低,GSH-Px、CAT、SOD活力升高,LDH活力降低,Nox2、Keap 1表达降低,Nrf2、HMOX1、xCT、GPX4表达升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).黄芪甲苷+高糖受损EPCs+ML385组各项检测指标与高糖受损EPCS组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:高糖能诱导EPCs出现氧化应激损伤,而黄芪甲苷能通过介导NFE2L2(Nrf2)/ARE信号通路发挥抗氧化应激作用,保护高糖诱导氧化应激损伤的内皮祖细胞.