基于网络药理学与体外实验探究蒙药古日古木-13降脂作用机制
The Mechanism of Lipid-Lowering Effects of Mongolian Medicine Gurigumu-13(古日古木-13)Based on Network Pharmacology and In Vitro Experiments
摘要目的:运用网络药理学方法研究蒙药古日古木-13治疗高脂血症的活性成分和作用机制,并通过分子对接和细胞实验进行验证.方法:利用TCMSP、PubChem、Swiss Target Prediction、PharmMapper等数据库筛选出古日古木-13治疗高脂血症的活性成分及其作用靶点,挖掘GeneCard、OMIM数据库中高脂血症疾病靶点,采用DAVID数据库进行GO富集分析和KEGG通路富集分析,并利用Cytoscape构建"成分-靶点-通路"网络,最后运用Autodock 4.2软件对活性成分和靶点进行分子对接验证.培养并诱导3T3-L1细胞分化为脂肪细胞,通过MTT和油红O染色检测药物对细胞活力和脂滴积累的影响,同时通过qPCR实验检测关键基因表达.结果:筛选获得古日古木-13的核心活性成分为鞣花酸、诃子次酸、白果内酯、小檗碱、6-羟基山柰酚.筛选出疾病与药物的交集靶点460个,对交集靶点通过构建蛋白互作分析网络,并对网络进行拓扑学分析筛选获得PIK3CA、Akt1、STAT3、TNF等核心作用靶点;对交集靶点进行GO、KEGG富集分析发现,过程涉及多个脂质代谢相关过程.对分析结果进行分子对接验证发现具有良好对接活性,且细胞实验证明古日古木-13可以减少脂质积累、减少细胞TG含量、增加细胞葡萄糖利用率,增加细胞中PI3K、Akt、PGC-1α基因表达.结论:古日古木-13能够有效治疗高脂血症并缓解细胞脂质积累,其机制可能为通过鞣花酸、诃子次酸、白果内酯、小檗碱等多个活性成分、多靶点、多途径作用对脂质代谢、PI3K、Akt、PGC-1等核心靶点进行调节,达到减少细胞脂质积累、调节脂代谢,进而缓解高脂血症的作用.
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