换一批养血安胎颗粒抑制外泌体中miR-16促进血管生成的作用研究
Effect of Yangxue Antai Granules on inhibiting miR-16 in exosomes to promote angiogenesis
摘要目的 探讨养血安胎颗粒调控血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)以促进血管生成的机制.方法 使用miR-16 mimic及养血安胎含药血清干预人绒毛膜癌细胞(JEG-3),差速离心法收集JEG-3细胞分泌的外泌体,并与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)共培养,CCK-8法测定JEG-3细胞和HUVECs的细胞活力,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)法测定JEG-3细胞、外泌体和HUVECs中miR-16水平,蛋白免疫印迹法(western blot,WB)测定JEG-3细胞和HUVECs中VEGF和磷酸化血管内皮细胞生长因子受体2(phosphorylated VEGF receptor 2,p-VEGFR2)的蛋白表达.结果 养血安胎含药血清能够增加JEG-3细胞的活力;转染miR-16 mimic后,JEG-3细胞、外泌体和HUVECs中miR-16水平增加,VEGF和p-VEGFR2蛋白表达降低,HUVECs细胞活力降低;养血安胎含药血清干预后,JEG-3细胞、外泌体和HUVECs中miR-16水平降低,VEGF和p-VEGFR2蛋白表达升高,HUVECs细胞活力升高.结论 养血安胎颗粒抑制JEG-3细胞外泌体中miR-16水平,进一步抑制HUVECs中的miR-16水平,进而增加HUVECs中VEGF和p-VEGFR2的蛋白表达,促进血管生成.
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