摘要目的 利用MIN6 细胞损伤模型探讨肾气丸加减方通过调控磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸—苏氨酸激酶/糖原合成激酶 3β(phosphoinositide3-kinase/threonine-protein kinase/glycogen synthase kinase-3β,PI3K/AKT/GSK-3β)信号通路保护胰岛β细胞功能的机制.方法 将MIN6 细胞分为空白组,模型组,肾气丸加减方低、中、高剂量组以及PI3K阻滞剂组(LY294002).用CCK-8 法检测各组细胞活性,胰岛素放射免疫分析试剂盒检测各组MIN6 细胞上清液胰岛素含量,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,免疫蛋白印迹法检测各组细胞中PI3K、磷酸化(phosphorylated,p)-PI3K、AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β 及胰腺十二指肠同源盒-1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)和肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物 A(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologue A,MafA)蛋白的表达.结果 与空白组比较,模型组MIN6 细胞活性明显下降,胰岛素分泌水平下降,细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与模型组比较,肾气丸加减方低、中、高剂量组细胞活力升高,胰岛素分泌水平升高,细胞凋亡率均降低(P<0.05 或 P<0.01);各干预组间比较差异无统计学意义(P>0.05).与空白组比较,模型组PI3K/p-PI3K、AKT/p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达明显下调,GSK-3β蛋白表达上调(P<0.05),PDX-1 和MafA蛋白表达明显下调(P<0.01);与模型组比较,肾气丸加减方中、高剂量组PI3K/p-PI3K、AKT/p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达均明显上调(P<0.05 或P<0.01),GSK-3β蛋白表达明显下调(P<0.01);PDX-1 和MafA蛋白表达明显上调(P<0.01);加入通路阻滞剂LY294002 后肾气丸加减方上述作用被抵消(P<0.05 或P<0.01).结论 肾气丸加减方可提高糖脂毒性作用下MIN6 细胞活力,减轻细胞凋亡,促进胰岛素分泌,以中、高剂量效果较佳,其机制可能与激活PI3K/AKT/GSK-3β 信号通路、抑制GSK-3β的表达有关,进而升高PDX-1 和MafA的蛋白表达,恢复胰岛β细胞功能.