新乌梅丸对溃疡性结肠炎患者naïve CD4+T细胞分化的影响
Effect of New Wumei Pills on differentiation of naive CD4+T cells in patients with ulcerative colitis
摘要目的 研究新乌梅丸对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者na?ve CD4+T细胞的影响.方法 使用SPF级雄性SD大鼠30只制备新乌梅丸含药血清;构建na?ve CD4+T细胞体外分化模型;CCK-8法筛选新乌梅丸含药血清干预na?ve CD4+T细胞的适宜浓度;使用流式细胞术检测na?ve CD4+T细胞纯度及含药血清对分化模型的影响;通过ELISA法检测细胞上清液白介素(interleukin,IL)-17A、IL-10细胞因子表达量,RT-qPCR检测葡萄糖转运蛋白1和糖酵解关键酶(HK2、PKM2、LDHA)的mRNA表达.结果 本研究提取了纯度为98.2%的na?ve CD4+T细胞,并以此为基础构建了 CD4+T细胞体外分化模型.CCK-8法筛选新乌梅丸含药血清干预na?ve CD4+T细胞的适宜浓度为2.5%、5%、10%.与模型组相比,经新乌梅丸干预后,na?ve CD4+T细胞向Th17细胞的分化明显减少(P<0.01),而向Treg分化明显升高(P<0.05).机制方面,与模型组相比,经新乌梅丸干预后,葡萄糖转运蛋白1及糖酵解相关酶(HK2、PKM2、LDHA)的基因水平均明显下降(P<0.05).结论 新乌梅丸可能通过抑制na?ve CD4+T细胞的糖酵解途径,从而调控其分化,恢复Th17/Treg免疫平衡,达到治疗UC的目的.
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