侧柏叶提取物对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移、血管生成蛋白表达的影响
The effect of extracts from Platycodon orientalis leaves on the proliferation,migration,and angiogenic protein expression of HUVEC cells
摘要目的 探讨侧柏叶提取物对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、迁移和血管生成的影响,为侧柏叶治疗雄激素性脱发(androgenetic alopecia,AGA)提供新的理论依据.方法 取对数生长期的HUVECs细胞株,分别用不同梯度浓度的侧柏叶提取物(30、100、300、1 000、3 000、9 000 μg/mL)处理细胞24小时,通过CCK-8实验,检测侧柏叶提取物对HUVECs细胞的安全有效浓度.将细胞分为对照组与侧柏叶组,采用CCK-8方法评估在最佳有效浓度下,侧柏叶提取物处理24、48、72小时后HUVECs细胞的增殖活性.采用细胞划痕实验,观察侧柏叶提取物处理24小时后细胞的迁移能力.采用免疫荧光染色与免疫印迹(Western blot,WB)法检测侧柏叶提取物对HUVECs细胞中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)与成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)蛋白的表达.结果 100 μg/mL的侧柏叶提取物对细胞有明显促增殖作用,浓度为300 μg/mL时开始出现细胞毒性.与对照组相比,侧柏叶组干预HUVECs细胞24、48、72小时后,HUVECs细胞增殖率均升高(P<0.05),48小时最为显著.与对照组比较,干预24小时后,侧柏叶组中细胞迁移能力升高(P<0.05),且VEGFA与FGF2蛋白的表达水平升高(P<0.05).结论 侧柏叶提取物可以促进HUVECs细胞的增殖、迁移,并可以升高HUVECs细胞中VEGFA和FGF2的表达水平,这可能为侧柏叶在AGA治疗中的分子机制提供了新的理论依据.
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