藜芦甘草汤对帕金森病小鼠酪氨酸羟化酶阳性神经元的影响及机制探究
Effect and mechanism of Lilu Gancao Tang on tyrosine hyhdroxylase-positive neurons in a mice model of Parkinson's disease
摘要目的 探讨藜芦甘草汤对 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病小鼠的脑黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经元及行为学和凋亡相关蛋白的影响.方法 将 24 只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、藜芦甘草汤组及美多芭组,每组6 只,采用MPTP腹腔注射的方法制备帕金森病小鼠模型,造模成功后的18 只小鼠按组别给药.采用爬杆实验和悬挂实验进行行为学评价;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测脑TH阳性神经元变化;蛋白质免疫印迹法检测黑质区凋亡相关蛋白 B 淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2 相关 X 蛋白(Bcl-2 associated X,Bax)、及半胱天冬酶3(Caspase-3)的表达.结果 与空白组比较,模型组小鼠爬杆时间明显延长(P<0.01),悬挂得分明显降低(P<0.01),神经细胞凋亡数量显著增加(P<0.01),纹状体TH阳性神经元荧光强度显著降低(P<0.01),Bax/Bcl-2、Caspase-3/Gapdh蛋白表达比值显著升高(P<0.01,P<0.05).与模型组比较,藜芦甘草汤组和美多芭组小鼠爬杆时间显著缩短(P<0.05 或P<0.01);第7天和第14 天时悬挂得分明显增加(P<0.05 或P<0.01),第21 天时仅藜芦甘草汤组的悬挂得分增加(P<0.05).与模型组比较,藜芦甘草汤组和美多芭组神经细胞凋亡数量显著减少(P<0.01),脑组织神经元荧光强度均显著增高(P<0.01),Bax/Bcl-2 蛋白表达比值明显下调(P<0.01),Caspase-3/Gapdh蛋白表达比值显著下降(P<0.05).结论 藜芦甘草汤可能通过降低凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2、Caspase-3/Gapdh表达水平,保护黑质区TH阳性神经元,减少神经元凋亡.
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