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基于miR-135a/miR-135b调控HOXA10表达探讨滋肾祛瘀解毒方改善子宫内膜异位症性不孕患者冻融胚胎移植结局的机制研究

Exploring the mechanism of Zishen Quyu Jiedu Prescription in improving frozen-thawed embryo transfer outcomes in endometriosis-related infertility via miR-135a/miR-135b regulation of HOXA10 expression

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摘要目的探讨滋肾祛瘀解毒方对子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)性不孕患者冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)结局的影响及治疗机制.方法将66例肾虚血瘀型EMs性不孕患者随机分为试验组33例和对照组33例,另选33例男方因素不孕症行FET的患者作为观察组.试验组脱落2例(1人未按医嘱服药,1人未完成微创取内膜术),剩余31例行滋肾祛瘀解毒方治疗;对照组脱落2例(2人未按照医嘱服药),剩余31例行安慰剂颗粒治疗;观察组脱落2例(1人因个人原因中途放弃,1人未按医嘱服药),剩余31例行安慰剂颗粒治疗同对照组.治疗3个月经周期后对患者进行综合评价.比较试验组和对照组患者肾虚血瘀证候积分.在胚胎移植后25～38天行超声检查,计算临床妊娠率.检测三组患者子宫内膜HOXA10蛋白、HOXA10 mRNA、miR-135a、miR-135b的表达量,并通过双荧光素酶试验检测HOXA10与miR-135a、miR-135b的结合情况.结果经过3个月经周期的治疗后,试验组与对照组患者的肾虚血瘀证候积分较本组治疗前明显降低(P＜0.01),试验组治疗后较对照组肾虚血瘀证候积分降低更多,但未见明显统计学差异(P＞0.05).试验组的临床妊娠率(54.8％,17/31)高于对照组(48.4％,15/31),低于观察组(58.1％,18/31),组间未见明显统计学差异(P＞0.05).治疗后,试验组HOXA10 mRNA及蛋白表达量高于对照组,低于观察组(P＜0.01);试验组miR-135a、miR-135b表达量低于对照组,高于观察组(P＜0.01).双荧光素酶报告显示HOXA10与miR-135a、miR-135b直接结合.结论滋肾祛瘀解毒方可以通过下调miR-135a、miR-135b的表达,继而升高HOXA10 mRNA和蛋白表达量,从而提高EMs性不孕患者子宫内膜容受性,改善患者肾虚血瘀体质,促进胚胎着床.