摘要目的 基于网络药理学与分子对接、动物实验验证的方法,探究四物汤调节免疫功能的雌激素样效应及其分子机制.方法 通过TCMSP、CTD、Omim、Immport等数据库筛选四物汤—雌激素—免疫相关交集靶点;STRING 在线平台构建蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络;DAVID 6.8 数据库进行GO和KEGG富集分析;AutoDock vina进行分析对接.将40 只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、雌二醇组、四物汤高剂量组、四物汤低剂量组,除空白组外,其余组在实验第1～3 天腹腔注射80 mg/(kg·d)的环磷酰胺.雌二醇组灌胃 0.22 mg/(kg·d),连续 7 天;四物汤高剂量组灌胃20 mg/(g·d),连续7 天;四物汤低剂量组灌胃10 mg/(g·d),连续7 天.测定小鼠体质量变化率、脾脏与胸腺指数;苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)测定小鼠脾脏组织形态;流式细胞术检测脾组织CD4+/CD8+T、CD19+B淋巴细胞数的变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测脾组织雌激素受体 β(estrogen receptor β,ERβ)、肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转录因子 p65(nuclear factor κb p65 subunit,RELA)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β的mRNA表达量;组织免疫荧光实验检测脾组织ERβ、RELA、p-RELA表达水平.结果 筛选四物汤—雌激素—免疫相关靶点276 个,涉及177 条信号通路,分子对接验证主要活性成分(儿茶素、川芎嗪、绿原酸、没食子酸、山奈酚)与核心靶点(TNF、信号转导因子和转录激活因子 3、表皮生长因子受体、RELA、IL-6、IL-1β)具有良好结合力.四物汤可保护小鼠免疫器官与细胞,较模型组显著提高CD4+/CD8+比值与CD19+B淋巴细胞数量(P＜0.05),促进小鼠脾脏组织TNF-α、IL-1β、ERβ、RELA、p-RELA的表达(P＜0.05).结论 四物汤通过介导ERβ来激活核因子-κB信号通路,以实现调节免疫功能的雌激素样效应.