换一批四环素tet-off系统调控的DT/VEGF融合基因对肝细胞癌的杀伤效应
Killing effect of tetracyclinecontrolled expression of DT/VEGF system on liver cell cancer
摘要目的 研究四环素tet-off调控系统对DT390-VEGF165及DT390-VEGFexon7融合基因的调控作用,探索毒素融合基因在调控状态下治疗肝癌的有效途径.方法 构建四环素tet-off调控的DT390一VEGF165或DT390-VEGFexon7融合基因真核表达载体,用脂质体介导转染肝细胞癌HepG2,在四环素有或无的情况下观察肝癌细胞的形态变化,用质粒直接注射法观察构建物对荷肝癌裸鼠的治疗效果.结果 3μg真核表达构建物转染5×105个肝癌细胞/孔(24孔板)96 h后发现,无四环素时转毒素融合基因的细胞存活率为20%,对照细胞存活率为77%;四环素存在时转毒素融合基因的细胞存活率为68%,对照细胞存活率为74%;转染细胞在四环素有或无的情况下经免疫荧光抗体染色均呈现黄绿色荧光,表明融合基因在细胞中得到了表达,且四环素调控系统存在基础量的漏表达;用质粒直接注射瘤体虽可观察到质粒被吸收和表达,但由于表达效率低下,没有明显的治疗效果.结论 四环素调控系统基本上可以控制毒素基因在肝癌细胞中的表达.
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医学主题词
四环素(Tetracycline)基因(Genes)肝肿瘤(Liver Neoplasms)转染(Transfection)癌, 肝细胞(Carcinoma, Hepatocellular)
分类号
R73（肿瘤学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1009-3079.2000.08.007
发布时间
2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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