5-Aza-CdR对人结肠癌Lovo细胞增殖凋亡及抑癌基因RUNX3表达的影响

Effects of 5-Aza-CdR on cell proliferation and apoptosis in colonic cancer cell line Lovo and expression of tumor suppressor gene RUNX3

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摘要目的:研究抑癌基因RUNX3在人结肠癌细胞中的表达情况,探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人结肠癌Lovo细胞增殖凋亡及RUNX3表达的影响.方法:用特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR0.4,4,40 μmol/L处理人结肠癌细胞株Lovo3 d,继续常规培养5 d后,采用四唑盐(MTT)比色观察细胞经药物处理前后的生长活性,以半定量RT-PCR检测细胞处理前后抑癌基因RUNX3 mRNA的表达,应用流式细胞仪进行细胞凋亡率的检测.结果:人结肠癌细胞Lovo经处理后,与对照组比较,5-Aza-CdR 0.4,4,40 μmol/L均能明显抑制肿瘤细胞生长,随5-Aza-CdR浓度增加,细胞生长速率下降;对照组Lovo细胞未见RUNX3 mRNA表达,经药物处理后的细胞均检出该种mRNA的重新表达,其mRNA的表达相对量分别为0.46±0.06,0.71±0.06,0.84±0.07,与药物存在剂量依赖性(F=168.4,P＜0.01);对照组细胞凋亡率为2.92%±0.93%,5-Aza-CdR 0.4,4,40 μmo1/L处理后Lovo细胞凋亡率分别为10.95%±2.09%,17.61%±1.51%,26.60%±1.89%,与对照组相比较均有统计学意义(P＜0.01),且凋亡率与5-Aza-CdR剂量呈正相关(F=145.7,P＜0.01).结论:在人结肠癌细胞株Lovo中,基因RUNX3可能因过甲基化而导致转录失活,RUNX3基因重新表达能抑制细胞生长,并能诱导部分细胞凋亡.