换一批内毒素休克小鼠肝脏细胞质膜差异蛋白质组的二维液相色谱分析
Two-dimensional liquid chromatography analysis of differential proteome of liver Plasma membrane in mice with endotoxic shock
摘要目的:建立和优化肝脏细胞质膜蛋白质研究的方法系统,并对正常组小鼠和内毒素休克小鼠组肝脏细胞质膜蛋白质进行二维液相色谱分离,分析两者之间的差异表达谱.方法:BALB/c 小鼠20只随机分为正常组和内毒素休克小鼠组(10只,LPS刺激3 h,LPS剂量为35 mg/kg),n=10.采用差速离心结合蔗糖密度梯度离心法分离和富集两组肝脏细胞质膜蛋白,分别将两组样品按蛋白质PI进行一维的色谱聚焦分离,然后每个PT组分再按蛋白质的疏水性经二维HPLC分离,利用Proteo Vue软件将UV光吸收图谱转换成PI对疏水性的胶样图谱,再利用DeltaVue软件分析两组肝脏质膜蛋白质组的表达差异.结果:图像分析显示两组比值在≥2.0及≤0.5的差异蛋白点共有24个,与正常组比较,在内毒素休克小鼠的肝脏质膜蛋白中有16个蛋白点表达上调,8个蛋白点表达下调.结论:正常组和内毒素休克小鼠组的肝脏质膜蛋白质组有明显差异.
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