摘要目的:研究克氏螯虾壳聚糖抗菌的作用靶位,探讨其抗菌机制.方法:用5(6)-羧-四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺标记克氏螯虾壳聚糖,应用标记克氏螯虾壳聚糖与大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌在pH5.6,37℃条件下220 r/min作用3.5 h,观察作用前后上清液中的核酸和蛋白质含量变化,并用激光共聚焦显微镜观察其对细菌的聚集部位.结果:荧光标记克氏螯虾壳聚糖对大肠埃希菌作用前后的上清液中,核酸和蛋白质的含量由作用前的0.00和0.22±0.01升高为1.13±0.06和1.49±0.05(P<0.01);对金黄色葡萄球菌作用前后的上清液中,核酸和蛋白质的含量由作用前的0.03±0.06和0.21±0.02升高为1.00±0.10和0.81±0.01(P<0.01);并且荧光标记克氏螯虾壳聚糖浓度越高,核酸及蛋白质含量也逐渐增高:激光共聚焦显微镜下显示两种实验细菌由表及里的荧光强度逐渐增强.结论:克氏螯虾壳聚糖的抗菌作用靶位,除部分作用于细菌细胞膜外,主要是进入细菌内作用于细胞器.
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