新型减毒HSV-2疫苗IFN-γ ELISpot检测方法的建立
Establishment of IFN-γ ELISpot Assay for a New Attenuated HSV-2 Vaccine
摘要通过比较不同刺激物、细胞培养时间、细胞接种浓度、免疫途径,建立检测新型减毒HSV-2疫苗细胞免疫水平的IFN-γ ELISpot方法.对C57BL/6小鼠进行减毒HSV-2疫苗免疫,第14天加强免疫,第21天分离小鼠脾脏淋巴细胞,采用IFN-γ ELISpot检测该疫苗的细胞免疫水平.结果表明:最佳实验孔刺激物为紫外灭活30 min、原滴度为108CCID50/mL的疫苗全病毒颗粒,最佳细胞培养时间为24~48 h,最佳细胞接种浓度为3×106cells/mL,最佳免疫途径是皮下注射.实验建立了针对该疫苗的IFN-γ ELISpot方法,为该疫苗提供了一种检测细胞免疫水平的方法.
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