换一批
换一批猴痘病毒A33R、L1R、B5R和A27L蛋白表达及生物学特性
Expression,Purification and Characterization of A33R,L1R,B5R and A27L Proteins of Monkeypox Virus
摘要为给猴痘病毒的抗原制备和疫苗制备奠定基础,原核表达带有GST标签的融合蛋白A33R、L1R、B5R和A27L,并简要分析这四个蛋白的一些生物学特性.用PGEX-6P-1为载体,构建重组融合蛋白表达质粒;用大肠杆菌DE3感受态细胞转化重组质粒后,在体外诱导表达和纯化;纯化的蛋白进行SDS-PAGE电泳,做考马斯亮蓝染色分析并用WB进行验证.最后,通过生物信息学方法分析4个蛋白的生物学特性,用ExPAsy在线软件中的ProtParam工具和ProtScale工具分别分析其理化性质和亲疏水性,用SignalP4.1 service在线软件分析其信号肽,成功构建了 4个重组目的蛋白表达质粒,并成功诱导表达并纯化出带GST标签的目的蛋白.通过生物信息学的方法分析可知,4个蛋白均为疏水蛋白,除了 B5R,A33R、L1R和A27L均为分泌蛋白,为猴痘病毒的抗原制备和疫苗制备提供理论基础.
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