换一批摘要目的:构建增殖细胞抗原(PCNA)的小发夹结构RNA(shRNA)的真核表达载体并在 HeLa细胞表达,同时观察PCNA的shRNA对人HeLa细胞株体外增殖的影响及生物学特性的改变.方法:将PCNA的cDNA的shRNA引物插入真核表达载体pGenesil-1,构建真核表达质粒pGenesil-1-PCNA1-4,并通过酶切和测序等方法进行鉴定,将真核表达质粒pGenesil-1-PCNA1-4转染子宫颈癌细胞,运用Western blot检测PCNA的蛋白表达,流式细胞仪分析细胞周期变化.结果:PCNA的shRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长,阻滞细胞G0/G1-S期,PCNA的蛋白表达同时受到抑制.结论:PCNA的shRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长, 其抑制作用可能通过阻断PCNA蛋白表达实现,实验结果为进一步研究PCNA的shRNA对子宫颈癌的基因治疗奠定了基础.
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