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miRNA-376c-3p调控CASP-7表达抑制人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞生长和迁移

MiR-376c-3p Inhibits Proliferation and Migration of Human Gastrointestinal Stromal Tumor GIST-T1 Cell Line Through Regulating CASP-7

摘要目的:探讨miRNA-376c-3p(miR-376c-3p)对人胃肠道间质瘤GIST T1细胞迁移、增殖和凋亡的影响及其可能的调控机制.方法:qRT-PCR法检测13例胃间质瘤患者肿瘤和癌旁对照组织中miR-376c-3p表达;将miR-376c-3p类似物(mimic)、抑制物(inhibitor)和各自阴性对照分别转染GIST-T1细胞,另设空白对照组;qRT-PCR检测转染细胞miR-376c-3p表达;然后用CCK8检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞迁移能力;通过Western Blot及qRT-PCR法检测miR-376c-3p对CASP-7 (Caspase-7)表达量的影响.结果:在胃间质瘤患者癌组织中,miR-376c-3p表达水平显著降低,为癌旁对照组织的58.7% (P<0.01);qRT-PCR显示:转染miR-376e-3p mimic后,GIST-T1细胞miR-376c-3p表达明显上调(P<0.01),而转染miR-376c3p inhibitor后表达受抑制(P<0.01);miR-376c-3p mimic转染组细胞增殖活性、迁移能力明显抑制(P<0.01),凋亡率增强(P<0.05);另外miR-376c-3p过表达后CASP-7 mRNA和蛋白水平出现上调,相反地,miR-376c-3p抑制却导致CASP-7 mRNA和蛋白水平下调(P<0.05).结论:在人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞中miR-376c-3p可以间接调控CASP-7的表达,抑制细胞增殖、迁移能力,促进细胞凋亡.

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