换一批抗SARS-CoV-2卵黄抗体的制备与活性研究
Preparation and activity research of chicken yolk antibody targeting SARS-CoV-2
摘要目的:运用卵黄抗体(IgY)技术制备高效的抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)IgY并检测其免疫学活性.方法:使用SARS-CoV-2灭活疫苗免疫蛋鸡,运用冻融水稀释法、硫酸铵沉淀法和透析法从鸡蛋中提取IgY进行浓缩及纯化并优化IgY提取方法.采用SDS-PAGE对IgY的提取及纯化效果进行表征,BCA法检测纯化后蛋白的浓度、间接ELISA法检测抗体对重组SARS-CoV-2 S1蛋白、N蛋白的效价及其热稳定性.对Balb/c小鼠分别给予15 d常规剂量IgY及30 d大剂量IgY口服及滴鼻处理,采用ELISA法测定小鼠血清对IgY免疫反应性及小鼠体内部分炎症指标IL-1β、IL-6、IFN-γ和TNF-α表达情况,明确IgY安全使用剂量.结果:纯化后IgY SDS-PAGE表征条带正确,IgY提取及纯化效果好.纯化后的IgY效价在免疫完成后第2周达到最高,在200 μg/mL时重组SARS-CoV-2 S1蛋白和N蛋白的效价高达1∶256.IgY抗体经25～60℃的温度处理4 h后活性仍基本保持稳定.常规剂量IgY未引起小鼠明显免疫反应.长期大剂量口服及滴鼻IgY时,IgY浓度为20 mg/mL处理组小鼠血清IL-1β、IL-6、IFN-γ及TNF-α分泌显著增加.结论:IgY技术具有快速获得针对不同抗原的高效IgY的潜力,且经其制成的IgY具有良好的热稳定性及生物安全性,但长期使用时IgY剂量应避免超过50 mg/kg,以免加重肾脏处理负担.
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关键词
IgY技术卵黄抗体(IgY)活性SARS-CoV-2被动免疫预防辅助治疗IgY TechnologyEgg Yolk Antibody(IgY)ActivitySARS-CoV-2Passive Im-munizationPreventionAdjunctive Therapy
分类号
R392.9（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.14188/j.1671-8852.2023.0529
发布时间
2024-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中央引导地方科技发展专项资金资助项目（2016ZYYD049）
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