换一批酵母双杂交技术筛选与绵羊微管解聚蛋白相互作用的蛋白
Screening of the proteins interacting with sheep stathmin by the yeast two-hybrid technology
摘要采用TRIzol法提取绵羊卵巢组织总RNA,运用RT–PCR技术扩增绵羊微管解聚蛋白基因(STMN1)的编码区序列;通过同源重组技术构建重组诱饵表达载体pGBKT7–STMN1,鉴定该诱饵蛋白在酵母双杂交系统中的自激活活性、细胞毒性和表达情况;利用诱饵质粒pGBKT7–STMN1从绵羊卵巢组织细胞的酵母双杂交cDNA文库筛选互作的宿主蛋白.结果显示:成功构建重组诱饵质粒pGBKT7–STMN1,并对酵母细胞无自激活活性和细胞毒性作用,且能在酵母细胞中正常表达;筛选获得12个与STMN1相互作用的克隆,经测序比对分析和点对点验证,得到CREB和FOXM1共2个互作的宿主蛋白,这2个蛋白可能参与调控细胞的增殖、周期、凋亡等过程.
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分类号
S826.3
栏目名称
DOI
10.13331/j.cnki.jhau.2022.02.012
发布时间
2022-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（32071447）
河南省高等学校重点科研项目（21A180027）
河南省自然科学基金（202300410509）
河南省科技攻关项目（222102110421）
郑州师范学院大学生科研创新基金（2021013）
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