换一批抗龋基因疫苗pcDNA3-gtfB整合宿主细胞基因组DNA的可能性研究
Study on Potential Anti-caries DNA Vaccine pcDNA3-gtfB Integration into Host Cell Genome
摘要目的用基因疫苗pcDNA3-gtfB免疫大鼠,探讨基因疫苗整合入宿主细胞的可能性.方法 将36只Wistar大鼠分为两组,一组为pcDNA3-gtfB颌下腺免疫组,另一组为PBS缓冲液颌下腺对照组.取Wistar大鼠颌下腺、肾脏、肝脏、心脏、肺脏、脑组织,以对照组6种组织基因组DNA为模板,加入不同梯度拷贝数的pcDNA3-gtfB,采用Pyrobest聚合酶PCR反应体系,确定PCR反应敏感性.以免疫组6种组织基因组DNA为模板,检测pcDNA3-gtfB的整合率.结果 本实验PCR体系的检测水平为在10 000个组织细胞核中能检测出一个pcDNA3-gtfB拷贝(1∶10 000),在此检测水平下,免疫组6种组织基因组DNA中未发现整合.结论 pcDNA3-gtfB整合入宿主细胞基因组DNA的概率不超过1∶10 000,尚未发现抗龋基因疫苗pcDNA3-gtfB整合入宿主细胞基因组DNA的证据.
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