换一批
换一批Notch1蛋白高表达抑制破骨细胞增殖和分化
Up-regulation of Notch1 inhibits proliferation and differentiation of osteoclast in vitro
摘要目的 探究体外培养条件下Notchl蛋白高表达对细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)诱导的骨髓源破骨细胞增殖分化的影响.方法 体外培养Rosa-notch1转基因小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),采用RANKL和MCSF刺激BMSCs向破骨细胞方向分化.培养至第3天,实验组和对照组分别转染携带Cre重组酶和绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒(Ad-Cre-GFP)和携带GFP的重组腺病毒(Ad-GFP),启动实验组Notch1高表达,采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测Notch信号通路成分(Notch1、Notch2、Notch3、 Notch4、Delta1、 Delta3、Delta4、Jaggedl)、靶基因(Hesl) mRNA表达量以及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)在诱导后mRNA的表达量.采用TRAP染色法观察破骨细胞增殖分化情况.结果 TRAP染色显示实验组破骨细胞形成数量明显少于对照组(P＜0.05).与对照组相比,实验组Notch1、Notch3、Jagged1、Delta3、Hes1 mRNA表达量明显增高(P＜0.05),TRAP的mRNA表达量明显降低(P＜0.05).结论 Notch1高表达抑制RANKL和MCSF诱导的破骨细胞增殖分化.
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