沉默Foxp3对牙周膜成纤维细胞在炎症环境下炎症因子的表达及增殖和迁移的影响
Effects of Foxp3 gene silencing on the expression of inflammatory cytokines and the proliferation and migration of human periodontal ligament fibroblasts in an inflammatory environment
摘要目的 探究炎症环境下Foxp3基因对人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)炎症因子表达及细胞增殖、迁移的影响,探索Foxp3基因在牙周炎发生发展中的作用.方法 使用小干扰RNA(siRNA)沉默hPDLFs的Foxp3基因,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹(Western blotting)实验验证Foxp3沉默效率,筛选Foxp3基因沉默效果最佳的siRNA.使用牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)来源脂多糖(LPS)模拟体外炎症环境,CCK-8检测炎症环境下沉默Foxp3对hPDLFs增殖的影响;划痕实验及transwell细胞迁移实验检测炎症环境下沉默Foxp3对hPDLFs迁移的影响;RT-PCR、Western blotting实验检测炎症环境下hPDLFs炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-8的表达.结果 siRNA转染后,RT-PCR、Western blotting检测显示,Foxp3-si3组Foxp3的mRNA和蛋白表达均显著降低(mRNA表达,t=21.03,P<0.0001;蛋白表达,t=12.8,P<0.001).在炎症环境下,Foxp3基因沉默对hPDLFs的增殖无显著影响(P>0.05);Foxp3基因沉默促进hPDLFs的迁移,IL-6、IL-8的表达升高(P<0.05).结论 在炎症环境下,Foxp3基因沉默可促进hPDLFs迁移和炎症因子表达升高,但对hPDLFs的增殖无明显影响.Foxp3基因在牙周炎中具有抑制炎症的作用.
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