摘要目的 探究人参皂苷Rb3(Rb3)在牙周炎症环境中对成骨的促进作用,并阐述其机制.方法 组织块法培养人牙周膜干细胞(hPDLSCs),通过流式细胞术进行细胞干性鉴定.细胞计数试剂盒(CCK-8)、钙黄绿素乙酰氧基甲酯(Calcein-AM)与碘化丙啶(PI)检测Rb3对hPDLSCs活力的影响.体外细胞实验分组:对照组、10 μg/mL脂多糖(LPS)组、10 μg/mL LPS+100 μmol/L Rb3组和10 μg/mL LPS+200 μmol/L Rb3组.碱性磷酸酶(ALP)染色检测成骨诱导后各组hPDLSCs的ALP活性.定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测成骨诱导后各组hPDLSCs中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、runt相关转录因子2(RUNX2)、转化生长因子-β(TGF-β)基因的表达情况.蛋白质免疫印迹(Western blot)检测各组hPDLSCs内磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)相关蛋白表达情况.Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、结扎组、结扎+Rb3组.对左侧磨牙-上颌骨组织行显微计算机断层扫描(micro-CT)检测;检测完成后,将左侧磨牙-上颌骨制作牙周组织切片.苏木精-伊红(HE)染色检测炎细胞浸润、附着丧失情况.马松(Masson)染色检测牙龈胶原纤维的破坏情况.免疫荧光染色检测RUNX2蛋白、p-ERK蛋白表达情况.qRT-PCR法检测大鼠牙龈组织中TGF-β的表达情况.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠外周血清IL-6蛋白表达情况.大鼠心脏血行流式细胞术,检测Treg细胞占比.采用GraphPad Prism 10.1.2软件对实验数据进行统计学分析.结果 Rb3对hPDLSCs活性无影响.hPDLSCs成骨诱导后的qRT-PCR与ALP染色结果显示Rb3可抑制炎症性hPDLSCs内IL-6、IL-8基因表达,促进TGF-β基因表达,同时促进炎症性hPDLSCs成骨分化.Western blot结果显示Rb3抑制炎症性hPDLSCs p-ERK蛋白表达.micro-CT、Masson染色、HE染色结果显示Rb3可促进牙周炎大鼠牙槽骨的形成,同时抑制牙周纤维组织破坏、附着丧失及炎症细胞浸润.流式细胞术结果显示Rb3可促进牙周炎大鼠外周血Treg细胞分化.ELISA与qRT-PCR结果显示Rb3可抑制牙周炎大鼠IL-6蛋白表达,促进TGF-β基因表达.免疫荧光结果显示Rb3可促进牙周炎大鼠RUNX2蛋白表达,抑制p-ERK蛋白表达.结论 Rb3可能通过调控p-ERK通路减轻牙周炎大鼠牙周组织炎症反应,并促进hPDLSCs成骨分化.