肥大细胞激活及组织胺水平测定

Challenge of Mast Cell and Measurement of Histamine

二维码有效期 120s

摘要目的建立肥大细胞激活及组织胺测量的实验研究系统.方法将手术切除的人类肺、皮肤、扁桃体及关节滑膜组织剪碎后,在37℃条件下用Ⅰ型胶原酶和Ⅰ型透明质酸酶进行消化.经洗净及肥大细胞计数后,悬浮的细胞被均匀地加入含刺激剂、抑制剂或缓冲液的试管中,并在37℃条件下培养15分钟,用冷HBSS缓冲液及离心方法终止上述反应,取上清液置-37℃下保存.用与组织胺特异结合的玻璃纤维为基础的荧光显色法测量组织胺.结果肺、皮肤、扁桃体和关节滑膜组织的肥大细胞分别占相应组织悬浮细胞总数的4%、5%、0.5%和4%左右.各组织中肥大细胞自发性组织胺释放量均占其组织胺总量的9% 以内.绵羊抗人IgE和钙离子载体的最佳浓度分别是1% 和1 μmol/L,其分别能引起高达19% 和56% 的肥大细胞组织胺释放.肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂亮肽素(亮肽素)能抑制IgE依赖性肺及扁桃体肥大细胞的激活.结论酶消化法分离肥大细胞为肥大细胞激发试验提供了快速、重复性好的试验基础.以玻璃纤维特异性结合组织胺为基础的组织胺测量方法重复性好、样品用量小,节省人力及财力.绵羊抗人IgE和钙离子载体均为肥大细胞的有效激活剂.亮肽素能抑制IgE依赖性肥大细胞的激活.