摘要目的构建人釉原蛋白基因真核表达克隆. 方法从胚龄20周的引产胎儿牙胚中提取总RNA,RT-PCR法扩增人釉原蛋白编码区基因,重组到真核表达载体PcDNA3.1中,经酶切和DNA序列分析验证. 结果经RT-PCR扩增后,得到大小约570 bp的特异性产物,与预期的人釉原蛋白mRNA编码区碱基长度一致,重组克隆PcDNA3.1-AMG的测序结果显示,与GenBank中的人釉原蛋白基因(AMELX)序列仅在第485位碱基发生错配(G→C),但不影响氨基酸组成.结论本研究成功的构建了人釉原蛋白基因真核表达克隆,为进一步研究牙周组织再生的基因治疗奠定了基础.
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