换一批兔防御素对耐药绿脓杆菌的抗菌活性及机制研究
in vitro Antimicrobial Activity of Defensins from Rabbit Neutrophils Against Pseudomonas Aeruginosa and Its Multiple-drug-resistance Strains
摘要目的探讨兔中性粒细胞防御素对绿脓杆菌耐药株的抗菌活性及其作用机制.方法用柠檬酸抽提法,从家兔中性粒细胞溶酶体中提出防御素粗制品,经酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(AU-PAGE)分离纯化.体外采用微量琼脂糖扩散实验,观察兔中性粒细胞防御素NP2对绿脓杆菌ATCC27853及其多重耐药株的抗菌活性,透射电镜观察防御素作用后绿脓杆菌各株超微结构的变化.结果采用柠檬酸抽提法和酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳成功地分离纯化出兔中性粒细胞防御素NP2.NP2对绿脓杆菌ATCC27853及其多重耐药株有明显的抗菌活性,抗菌活性随防御素浓度升高而增强.透射电镜观察显示,防御素作用后的菌株细胞膜不连续,胞内成分固缩,伴空泡形成,胞间有大量漏出物.结论家兔中性粒细胞防御素NP2对绿脓杆菌多重耐药株具有杀菌活性.透射电镜观察结果提示了防御素对靶细胞膜损伤的杀菌机理.
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