换一批鼠VEGF红色荧光慢病毒载体的构建及其在293T细胞中的表达
Construction of Lentiviral Vector pTK208-mVEGF-IRES-DsRed Contains DsRed and mVEGF and Its Expression in 293T Cells
摘要目的 构建含鼠血管内皮细胞生长因子(mVEGF)红色荧光慢病毒载体,鉴定其在293T细胞中的表达.方法 构建含mVEGF和红色荧光蛋白(DsRed)基因双顺反子重组慢病毒质粒;采用脂染法将慢病毒系统三质粒共转染293T细胞,转染后24 h和48 h荧光显微镜下观察DsRed表达,收集48 h 和72 h病毒上清并感染靶细胞239T,荧光显微镜下观察DsRed表达情况,并行Western blot分析培养上清和胞浆内mVEGF表达.结果 成功构建慢病毒表达质粒pTK208-mVEGF-IRES-DsRed,重组慢病毒滴度达5×106 PFU/ mL,并获得蛋白DsRed和mVEGF的表达.结论 含mVEGF红色荧光慢病毒质粒成功介导mVEGF蛋白的表达,该载体有望为研究VEGF的病理生理学机制及基因靶向治疗提供有效的工具.
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关键词
慢病毒载体血管内皮细胞生长因子红色荧光蛋白293T细胞Lentiviral expression vectorVascular endothelial growth factorRed fluorescent protein293T cells
分类号
R392.4（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1672-173X.2010.02.003
发布时间
2010-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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