低氧对人血管内皮细胞血管紧张素转换酶2表达影响的研究
Effects of Hypoxia on the Expression of Angiotensin-converting Enzyme 2 in Human Umbilical Vein Endothelial Cells
摘要目的 观察低氧环境对人血管内皮细胞血管紧张素转换酶2(ACE2)表达的影响,并初步探讨其作用机制.方法 人脐静脉内皮细胞株(HUVECs),进行贴壁细胞培养;采用免疫组织化学方法对细胞株进行Ⅷ因子鉴定,设立低氧实验组与常氧对照组.低氧组条件为1%O2+94%N2+5%CO2,常氧对照组的细胞置于5%CO2+95%空气孵箱内培养,37℃培养3 h、6 h、12 h、24 h,收集培养液和细胞;采用免疫组化鉴定ACE2蛋白合成情况,实时荧光定量RT-PCR检测ACE2 mRNA表达水平.结果 ①与常氧组对照,低氧3 h、6 h、12 h、24 h组ACE2蛋白表达均有所下降(P均≤0.00625),其中低氧3 h组的阳性率最低为14.53%,并且随时间延长呈现逐渐上升趋势;②与常氧对照组相比,低氧3 h、6 h、12 h、24 h组ACE2 mRNA表达量均有所下降,其中低氧3 h组ACE2mRNA相对表达率为0.281(P=0.031),低氧6 h组为0.445(P=0.034),低氧12 h组为0.794(P=0.434),低氧24 h组为0.891(P=0.692).结论 在24 h内,低氧使人血管内皮细胞ACE2蛋白的合成以及ACE2 mRNA的表达减少,并且以3 h最为明显,后出现逐渐升高趋势.这种先减少后增加的趋势,提示逐渐升高的ACE2对血管内皮缺氧损伤后的肾素血管紧张素系统(RAS)的反向调节有着重要作用.
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