类风湿关节炎中CCL19/IL-1β正反馈环路的体外实验
CCL19/IL-1β Positive Feedback Loop Involved in the Progress of Inflammation in Rheumatoid Arthritis
摘要目的 探讨趋化因子(C-C基序)配体19(CCL19)在类风湿关节炎发病中的功能及机制.方法 收集5例类风湿关节炎患者的滑膜细胞,另采用密度梯度离心法分离出5例健康人外周血单个核细胞(PBMCs),对两种细胞分别给予白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-17等细胞因子刺激,实时定量PCR检测细胞中CCL19和其受体CCR7基因的表达.同时,采用不同浓度的CCL19处理滑膜细胞和PBMCs,实时定量PCR检测细胞中IL-1β、TNF-α及CCR7的表达改变.利用Western blot技术检测不同浓度CCL19处理后的PBMCs中磷酸化的脑外信号调节激酶(p-ERK)、磷酸化p38 (p-p38)的表达情况.结果 IL-1β和TNF-α能促进滑膜细胞和PBMCs中CCL19/CCR7的表达,并具有协同效应;CCL19能促进滑膜细胞和PBMCs中IL-1β、TNF-α和CCR7的表达;CCL19可以活化PBMCs中的p-ERK和p-p38.结论 CCL19可能通过活化p-ERK和p-p38上调IL-1β表达,而高表达的IL-1β通过正反馈进一步促进CCL19的表达参与类风湿关节炎疾病的发生发展.
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