MiR-429及其目标基因HSPA4L在弱精症低活力精子中的表达
Expression of MiR-429 and Its Target Gene HSPA4L in Sperms from Asthenospermia Patients
摘要目的 探讨miR-429及其目标基因热休克蛋白A4L(HSPA4L)在弱精症患者低活力精子中的表达.方法 收集20份成年健康生育能力的精液标本和20份弱精症患者精液标本,按照WHO第五版规定的精液分级标准,对液化后的精液进行常规参数分析;利用qRT-PCR检测精子中miR-429的表达水平;通过生物信息学手法预测miR-429的靶点;构建HSPA4L 3'UTR双萤光素酶报告载体,采用双萤光素酶报告实验验证miR-429的靶基因;利用qRT-PCR和Western blot分别检测HSPA4L mRNA和蛋白的表达水平.结果 弱精症精子活力低于健康对照组,同时miR-429在弱精症精子中表达上调.通过生物信息学手法、双萤光素酶报告基因基检测以及转染实验发现miR-429通过作用于HSPA4L 3'UTR来抑制HSPA4L mRNA和蛋白的表达.进一步的qRT-PCR分析发现弱精症组的HSPA4L mRNA和蛋白的表达水平下调,并且HSPA4L mRNA表达水平与miR-429的表达水平呈负相关(r=-0.725,P<0.05).结论 MiR-429在低活力精子中的表达上调,可能通过调控HSPA4L基因来影响精子的活力.
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