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糖尿病环境下成骨细胞KDM6B表达的变化

Study on the Expression of KDM6B of Osteoblast in Diabetic Environment

摘要目的 研究糖尿病环境下骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨分化能力及组蛋白去甲基化酶KDM6B表达的变化情况.方法 制备糖尿病大鼠模型,分离培养糖尿病模型大鼠及正常大鼠来源的BMSCs,BMSCs以高糖、晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation products,AGE)模拟糖尿病环境,即将BMSCs分为6组:糖尿病组(糖尿病大鼠来源)和正常组(正常对照大鼠来源),高糖组(含D-葡萄糖30 mmol/L)和正常组(含普通浓度的D-葡萄糖5.5 mmol/L作为高糖对照),AGE组(含AGE 300 μg/mL)和牛血清白蛋白(BSA,作为AGE对照)组(含BSA 300 μg/mL).除糖尿病组BMSCs为糖尿病大鼠来源,其余BMSCs为正常对照大鼠来源.各组BMSCs分别成骨诱导7d后,进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色,观察BMSCs的诱导骨向分化能力;以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组BMSCs的成骨相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、组蛋白去甲基化酶KDM6B mRNA的表达,以Western blot检测H3K27Me3蛋白的表达.结果 糖尿病组、高糖组及AGE组BMSCs的ALP染色细胞数均少于其相应对照组(P<0.05),Runx2、KDM6B mRNA表达也均低于其对照组(P<0.05),而H3K27Me3蛋白表达均高于其对照组(P<0.05).结论 糖尿病环境下BMSCs成骨分化能力减弱,且Runx2 mRNA表达受到抑制,可能与KDM6B的表达抑制后H3K27Me3表达增加有关.

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作者 唐宇 [1] 胡赟 [1] 罗丹 [1] 丁晓倩 [1] 李彩玉 [1] 郑雷蕾 [1] 学术成果认领
作者单位 重庆医科大学附属口腔医院 重庆401145;口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室 重庆401145;重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室 重庆401145 [1]
栏目名称 论著
发布时间 2019-10-30
基金项目
国家自然科学基金 重庆市科卫联合医学科研重点项目 重庆市自然科学基金 2016年重庆高校创新团队建设计划
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四川大学学报(医学版)

四川大学学报(医学版)

2019年50卷5期

660-665页

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