ZEB2调控胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的实验研究
ZEB2 Regulates the Migration and Invasion of PANC-1 Pancreatic Cancer Cells: An Experimental Study
摘要目的 研究锌指E-box结合同源异型盒2基因(zinc finger E-box binding homeobox transcription factor-2,ZEB2)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭能力及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,?EMT)过程的影响.方法 分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中胰腺癌组织和癌旁组织中ZEB2的表达.将胰腺癌PANC-1细胞分为si-NC组、si-ZEB2组、pcDNA3.1组和pcDNA3.1-ZEB2组,采用qRT-PCR技术和Western blot法验证ZEB2敲降或过表达的有效性.CCK-8实验、集落形成实验、划痕实验和Transwell实验分别检测ZEB2对PANC-1细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭的影响.利用qRT-PCR技术和免疫荧光实验检测细胞中EMT标志物E-cadherin、vimentin的表达水平.通过STRING网站预测与ZEB2具有相互作用的蛋白.结果 TCGA数据库分析显示,与癌旁组织相比,胰腺癌组织中ZEB2表达水平明显升高(P<0.05).与si-NC组相比,si-ZEB2组PANC-1细胞的增殖、集落形成、迁移、侵袭能力减弱;与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-ZEB2组PANC-1细胞的增殖、集落形成、迁移、侵袭能力增强(均P<0.05).qRT-PCR技术和免疫荧光实验结果提示,与si-NC组相比,si-ZEB2组PANC-1细胞的上皮标志物E-cadherin mRNA表达升高,而间质标志物vimentin mRNA和蛋白表达降低;与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-ZEB2组PANC-1细胞中上皮标志物E-cadherin mRNA表达减少,间质标志物vimentin mRNA和蛋白表达增加(均P<0.05).STRING网站预测出10个蛋白与ZEB2作用密切.结论 过表达ZEB2能够促进胰腺癌PANC-1细胞的迁移、侵袭和EMT进程.
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