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Plectin通过诱导F-actin聚合增强肝癌细胞的迁移能力

Plectin Promotes the Migration of Hepatocellular Carcinoma Cells Through Inducing F-actin Polymerization

摘要目的 研究Plectin的表达与肝癌细胞迁移能力的关系,揭示Plectin表达影响肝癌细胞迁移行为的分子机理.方法 首先,Western blot检测正常肝细胞和肝癌细胞中Plectin的表达.其次,构建Plectin下调的肝癌细胞株,设立对照组(shNC组)和sh PLEC组,各组分别设溶剂对照组(shNC+DMSO组或sh PLEC+DMSO组)和F-actin骨架聚合诱导剂Jasplakinolide组(shNC+Jasp组或sh PLEC+Jasp组).采用Western blot检测各组肝癌细胞中Plectin的表达及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子(N-cadherin、vimentin和E-cadherin)的表达;采用Transwell小室法分析肝癌细胞的迁移能力;采用KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)分析与Plectin基因有关的信号通路;采用免疫荧光技术检测Plectin表达变化对细胞骨架F-actin聚合的影响.结果 与正常肝细胞相比,Plectin在肝癌细胞中高表达.与shNC组相比,sh PLEC组Plectin的表达降低(P<0.05),肝癌细胞的迁移能力减弱(P<0.05),EMT进程被抑制(N-cadherin和vimentin表达降低,E-cadherin表达升高)(P<0.05);KEGG分析发现细胞骨架F-actin调控与Plectin的联系最为密切,sh PLEC组肝癌细胞骨架F-actin发生解聚.采用F-actin骨架聚合诱导剂Jasplakinolide处理后,与sh PLEC+DMSO组相比,sh PLEC+Jasp组肝癌细胞迁移能力增强(P<0.05),EMT进程有所恢复(N-cadherin和vimentin表达升高,E-cadherin表达降低)(P<0.05),同时肝癌细胞骨架F-actin聚合亦有所恢复.结论 Plectin在肝癌细胞中高表达,肝癌细胞中Plectin通过诱导F-actin聚合促进肝癌细胞的迁移和EMT.

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四川大学学报(医学版)

四川大学学报(医学版)

2024年55卷1期

60-66页

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