摘要目的 设计新型含溴结构域蛋白4/组蛋白去乙酰化酶(bromodomain-containing protein 4/histone deacetylase,BRD4/HDAC)双靶点抑制剂11b,阐明其通过表观遗传调控抑制前列腺癌的药效及机制.方法 采用前列腺癌组织芯片免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测BRD4和HDAC表达.在三种前列腺癌细胞中筛选11b敏感细胞系,通过CCK-8法测定11b的半抑制浓度(IC50)值,Western blot分析目的蛋白[BRD4、Myc原癌基因蛋白(Myc proto-oncogene protein,c-Myc)和Ac-H3K27]变化,并与单靶点药物[HDAC抑制剂suberoylanilide hydroxamic acid(SAHA)、BRD4抑制剂JQ-1]平行比较.Transwell和克隆形成实验评估细胞侵袭增殖能力,联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)验证自噬机制.构建PC-3细胞裸鼠移植瘤模型,分别给予11b(7.5 mg/kg或15 mg/kg)、生理盐水、SAHA和JQ-1腹腔注射,观察其对肿瘤生长的抑制作用,免疫组化染色观察目的蛋白的阳性细胞百分比,RT-PCR检测目的蛋白的基因表达水平.结果 癌组织中BRD4和HDAC表达均高于正常组织(P<0.01).11b对PC-3细胞抑制活性最强(IC50=8.28 μmol/L),优于SAHA(22.61 μmol/L)和JQ-1(22.09 μmol/L).11b处理可使BRD4[(41.58±3.28)%]和 c-Myc表达量[(63.21±6.91)%]较NC组分别降低(P<0.01),并使Ac-H3K27水平升高至NC组的6.52倍(P<0.01),其调控幅度大于SAHA和JQ-1.体外实验证实,8 μmol/L 11b处理后PC-3细胞的克隆形成数和迁移细胞数较处理前分别减少97.5%和96.3%(P<0.001),且3-MA共处理可逆转其细胞毒性效应.体内实验显示,7.5 mg/kg 11b干预组和15 mg/kg 11b干预组小鼠的肿瘤体积与质量低于对照组、SAHA组及JQ-1组(P均<0.01),目的蛋白的阳性细胞百分比和基因表达变化趋势与体外一致.结论 新型双靶点抑制剂11b通过协同调控BRD4/HDAC通路显著抑制前列腺癌进展,其疗效显著优于单靶点药物SAHA和JQ-1,具有临床转化潜力.