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肠道病毒C组96型VP1蛋白线性B细胞表位筛选与鉴定

Screening and identification of linear B cell epitopes on the VP1 protein of enterovirus C96

摘要目的 鉴定肠道病毒C 组 96 型(enterovirus C96,EV-C96)VP1 蛋白的线性B 细胞表位.方法 采用IEDB网站提供的在线分析工具分析、预测EV-C96 VP1 蛋白的线性B细胞表位,结合其二级结构、β-转角、抗原性、亲水性等多项参数,筛选出优势候选表位;应用间接ELISA法检测候选表位与EV-C96 免疫血清的反应性以及与21 种其他常见手足口病病原血清的交叉反应性;应用微量中和试验测定表位抗体的中和效价;采用序列比对分析表位的序列保守性;应用结构对齐分析表位的结构特异性.结果 通过生物信息学筛选出EV-C96 VP1 蛋白7 个候选表位(P1~P7);ELISA法检测发现P7(氨基酸序列位置为282~304)与EV-C96 多克隆抗体有强反应性,与其他常见EV多克隆抗体不发生明显反应;微量中和试验显示,P7 抗体的中和效价低于1∶2;序列及结构分析结果显示,P7 的氨基酸序列在EV-C96 型内具有较高保守性,与其他EV相应位点氨基酸序列的结构有明显差异.结论 P7 表位为EV-C96 特异的非中和性B细胞表位,可作为开发EV-C96 检测试剂盒的候选抗原表位.

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