换一批
换一批聚乙二醇单修饰的重组人粒细胞集落刺激因子突变体的纯化与分析
Purification and analysis of rmhG-CSF mutant modified with polyethylene glycol
摘要目的 获得高活性的聚乙二醇定点单修饰的产物PEG-rmhG-CSF-Cys176.方法 用聚乙二醇马来酰亚胺基和高活性的重组人粒细胞集落刺激因子突变体(rmhG-CSF)的半胱氨酸(Cys)基团特异性结合,并用离子交换层析分离纯化修饰产物,通过高效凝胶过滤色谱检测纯度,MTT法检测体外的生物活性.结果 蛋白纯度为97%,体外生物活性为0.8×10~8 IU·mg~(-1).结论 半胱氨酸反应性PEG和游离Cys的结合是在rmhG-CSF活性区以外的位置C末端,修饰后的蛋白活性基本未受影响.
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