换一批
换一批摘要目的 采用两步层析法快速制备天花粉蛋白(TCS),并验证其SOD活性.方法 粉碎栝楼块茎并抽提,经硫酸铵分级沉淀,再经Blue-Sepharose CL 6B和SP-Sepharose两步层析,可获得TCS纯制剂;采用SDS-PAGE和PAGE鉴定其均一性;用MTT法检测TCS对Hela细胞的抑制作用;采用PAGE-NBT活性染色法与邻苯三酚自氧化法相结合检测了TCS的SOD活性.结果 用两步层析法可获得高纯度和高收率的TCS;经SDS-PAGE和PAGE鉴定,均为单一蛋白质着色带;TCS对Hela细胞增殖具有明显抑制作用,呈时间和浓度依赖关系;TCS不具有SOD活性.结论 所用TCS纯化方法简单、快速、收率高,可大量制备具有生物活性的TCS,同时也首次证明了TCS不具有SOD活性.
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关键词
天花粉蛋白SOD活性核糖体失活蛋白两步层析法栝楼TCS SOD activity Ribosome inactivating protein Two step chromatography method Trichosanthes kirilowii.
分类号
R93
栏目名称
研究论文
DOI
10.13375/j.cnki.wcjps.2014.05.008
发布时间
2014-11-17
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