换一批肿瘤靶向FoxM1-DBDp蛋白的噬菌体随机肽库筛选与分子模拟
Selection and molecular simulation of phage random peptide library targeting tumor associated FoxM1-DBDp protein
摘要目的 从噬菌体随机十二肽库中筛选和获得分子靶向FoxM1-DBDp重组蛋白的高亲和力和肿瘤细胞毒性作用的多肽小分子.方法 通过IPTG诱导、原核细菌体外重组表达和Ni-NTA亲和纯化,获得FoxM1-DBDp结合结构域蛋白;以其为靶标对噬菌体随机十二肽库进行四轮生物淘选,获取噬菌斑单克隆,反筛测定阳性克隆与靶蛋白亲和力;采用Discovery Studio 3.0(DS 3.0)分子模拟对接并用CCK-8测定高亲和力多肽对肿瘤细胞的抑制作用.结果 经过四轮生物淘选,高亲和力噬菌体明显得到富集;成功测序了15条序列.反筛测定结果表明:多肽P15具有较高的亲和力;DS分子模拟对接发现该序列与FoxM1-DBD具有最低的结合自由能.CCK-8测定结果显示:100 μg·mL-1处理浓度下,P15多肽对肝癌HepG2细胞的抑制率达75.52％.结论 通过噬菌体随机十二肽库筛选,成功筛选获得了多条分子靶向FoxM1-DBDp的高亲和力多肽序列,为分子靶向肿瘤密切相关FoxM1的多肽先导药物的研发提供了重要的前期理论基础.
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分类号
R914（药物基础科学）
栏目名称
DOI
10.13375/j.cnki.wcjps.2019.06.002
发布时间
2020-01-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81872789）
成都市重点研发支撑计划（2018-YF05-00004-SN）
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