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甲醛对南美白对虾(Penaeus vannamei)β-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶的失活动力学研究

Inactivation Kinetics of β-N-Acetyl-D-Glucosaminidase from Prawn (Penaeus vannamei) by Formaldehyde

摘要β-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶与南美白对虾的食物消化吸收、蜕壳生长有着密切关系.海水里存在的有机污染物将影响酶生理功能,从而进一步影响虾的正常蜕壳,严重将导致对虾的死亡.甲醛是常用的有机溶剂,故本文应用动力学方法研究了南美白对虾β-N-乙酰-D-氨基葡萄糖营酶在甲醛溶液中以pNP-NAG为底物时酶活力的变化规律.表明酶在甲醛浓度低于2.0 mol·L-1,酶的失活过程是可逆的,测得甲醛对酶抑制的IC50为1.05 mol·L-1.用双倒数作图法测定甲醛对酶的抑制类型,结果显示甲醛是酶的竞争性抑制剂,甲醛只能与游离酶(E)结合,底物对酶的失活具有保护作用.用底物反应动力学方法观测在不同底物浓度下酶在0.0、0.5、1.0、1.5、2.0 mol·L-1的醋酸酐溶液中的失活过程,分别测定了酶的微观失活速度常数k+0及复活速度常数k-0并加以比较,结果表明甲醛对酶的影响是缓慢结合同时导致失活的过程,比较微观失活速度常数k+0及复活速度常数k-0,结果暗示在高浓度的甲醛溶液中,酶将完全失活.

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