换一批
换一批CSFV及美洲型、欧洲型PRRSV多重qRT-PCR鉴别检测方法的建立及应用
Establishment and Application of Multiplex qRT-PCR for Differential Detection of CSFV and North American and European PRRSV
摘要根据猪瘟病毒(CSFV)以及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列特点,设计3对特异性引物和3条TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了能同时检测并区分CSFV以及美洲型、欧洲型PRRSV的多重TaqMan荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)方法.该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可以特异扩增CSFV和PRRSV,而与猪的其它常见病毒无交叉反应;对CSFV及美洲型、欧洲型PRRSV3种重组质粒标准品的检出下限均为2.68拷贝/μL;组内及组间重复试验的变异系数均小于1.5％.应用该方法对253份临床疑似样品进行检测,结果病原阳性106份,其中20份为CSFV阳性,86份为美洲型PRRSV阳性,11份为CSFV和美洲型PRRSV混合感染,未检测到欧洲型PRRSV.试验表明,研究建立的多重qRT-PCR方法可用于CSFV和PRRSV的快速鉴别检测及流行病学调查.
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关键词
猪瘟病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒多重TaqMan荧光定量RT-PCRclassical swine fever virus (CSFV)porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)multiplex quantitative TaqMan real-time RT-PCR (multiplex qRT-PCR)
分类号
S811.6
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1673-1182.2015.03.012
发布时间
2015-06-15
基金项目
广西科学基金项目（桂科青0832057）；
广西科学研究与技术开发计划项目（桂科转14125004-22）
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