换一批
换一批摘要目的 研究多梳蛋白家族成员NSPc1对HeLa细胞增殖的影响.方法 运用生物信息学设计并合成敲低NSPc1表达的siRNA序列,用半定量RT-PCR、Real-time PCR及Western blot等检测siRNA序列在HeLa细胞中敲低NSPc1的有效性;将相应有效序列构建到pSUPER载体中,观察其瞬时转染对HeLa细胞BrdU掺入的影响;用G418筛选并建立稳定敲低NSPc1的HeLa细胞系,观察敲低NSPc1对HeLa细胞体外增殖能力的影响.结果 (1)设计的siRNA序列可显著敲低NSPc1的表达;(2)瞬时敲低NSPc1阻碍了HeLa细胞BrdU的掺入;(3)成功构建稳定敲低NSPc1的HeLa细胞系,其增殖速度较对照组明显变慢.结论 NSPcl的正常表达是维持HeLa细胞正常增殖能力所必需的,稳定敲低NSPcl的HeLa细胞群可作为进一步研究NSPc1相关信号通路的有效模型.
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